matrixome層粘連蛋白511E8片段說明書

Laminin-511 是基底膜的主要成分，可作為多能干細胞（ES/iPS 細胞）的支架。
作為基底膜的一部分，層粘連蛋白 511 (800 kDa) 與細胞表面的整合素結(jié)合。
Laminin-511 是一種非常大的蛋白質(zhì) (800 kDa)，由三條鏈（α-、β-和 γ- 鏈）組成，并形成超分子聚集體。很難作為重組蛋白生產(chǎn)。
當我們將 Laminin-511 片段化并在細胞表面尋找與整合素結(jié)合的最小成分時，我們確定了稱為 Laminin-511 E8 片段 (150 kDa) 的成分。我們決定將該成分作為重組蛋白生產(chǎn)。
　

與“Laminin-511 (Intact)"相比，人類 iPS 細胞對 Laminin-511E8 片段的粘附更強。

與“Laminin-511 (Intact)"相比，人類 iPS 細胞對 Laminin-511 E8 片段的粘附更強。
比較了層粘連蛋白 511 E8 片段和其他底物的細胞附著。
吸光度 (OD570) 表示相對于對 Matrigel 的最大影響值進行歸一化的附著細胞的相對數(shù)量，該值被任意設置為 1。
該結(jié)果證實層粘連蛋白-511 E8 片段強烈地粘附于細胞。

單個人類 ES 細胞迅速附著在 Laminin-511E8 片段上并增殖。

分散的人單個 ES 細胞迅速粘附在 Laminin-511 E8 片段上并立即增殖。
我們在層粘連蛋白 511 E8 片段和其他細胞培養(yǎng)基質(zhì)上傳代人 ES 細胞。
傳代時單個人 ES 細胞集落證實 Laminin-511 E8 片段迅速粘附在細胞上并增殖。

在 ES/iPS 細胞培養(yǎng)中使用 Laminin-511E8 片段的更多優(yōu)勢

使用傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法，如果 ES/iPS 細胞分散成單個細胞，細胞就會死亡。
因此，在傳代時，一定程度上需要維持一個細胞集落。

使用 Laminin-511 E8 片段作為細胞培養(yǎng)基質(zhì)，甚至可以維持和培養(yǎng)單個 ES/iPS。
-> 減少學習細胞培養(yǎng)方法所需的時間。
-> 細胞培養(yǎng)的延伸效率顯著提高。

使用 Laminin-511E8 片段生長 ES/iPS 細胞

*5天
*菌落傳代方法

傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法（菌落傳代）傳代時的延伸效率為1:4，而使用Laminin-511 E8片段作為細胞培養(yǎng)基質(zhì)時，延伸率為1:100。

使用 Laminin-511E8 片段批量生產(chǎn) ES/iPS 細胞培養(yǎng)物

我們比較了傳統(tǒng)方法（菌落法）培養(yǎng)30天的ES/iPS細胞數(shù)量和使用Laminin-511 E8片段作為細胞培養(yǎng)基質(zhì)培養(yǎng)的ES/iPS細胞數(shù)量。圖表的橫軸表示培養(yǎng)天數(shù)，縱軸表示細胞數(shù)。
結(jié)果證實，與傳統(tǒng)方法（菌落法）相比，使用Laminin-511 E8片段的細胞數(shù)增加了200或更多。