殘留DNA提取試劑盒（碘化納法） 

殘留DNA提取試劑盒遵照中國(guó)藥典記載的碘化納法，適用于疫苗和治療用生物制品所含宿主細(xì)胞殘余DNA的提 取。

殘留DNA提取試劑盒可以提取樣品中含有的極微量的DNA，回收率較高。

DNA的提取操作時(shí)間為60-90 min。

提取的DNA可以通過(guò)qPCR進(jìn)行定量。

◆特點(diǎn)

● 遵照中國(guó)藥典登載的碘化納法

 ● 高回收率

● 單管操作（無(wú)需換管） ，耗時(shí)僅60-90 min

● 不需要苯酚和氯方等有機(jī)溶劑

● 兼容多種DNA *1 為使DNA檢測(cè)方法與標(biāo)準(zhǔn)保持同步，中國(guó)藥典（The Chinese Pharmacopoeia）宣布建立殘留細(xì)胞 *1 DNA檢測(cè)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。碘化納法將作為殘留DNA提取方法，被新增至2020版的中國(guó)藥典中。

◆原理 1. 使樣品中的蛋白質(zhì)和脂質(zhì)溶于碘化納和N-月桂基肌氨酸鈉； 2. 異丙醇與糖原選擇性地共沉淀DNA。

◆使用方法

方法1 

應(yīng)用實(shí)例 DNA spiking test（加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)） 

DNA Extractor™ Kit可以高產(chǎn)量提取殘留DNA，甚至少量殘留DNA。 

上海起發(fā)Ivy Fine Chemicals B48202現(xiàn)貨

Ivy Fine Chemicals Corporation，

目錄號(hào)B48202，50 次浸提，

4 ℃ 下可穩(wěn)定儲(chǔ)存 2 年

僅供實(shí)驗(yàn)室使用

溶液制備：

q 向清洗緩沖液中加入 70 mL 乙醇，

q 向碘化納溶液中加入 50 L 糖原

q 向清洗緩沖液中加入 2 L 糖原

DNA 提取程序：

q 向 2 mL 微量離心管中加入 500 L 各樣品或稀釋液

q 向各試管中加入 20 L 清潔劑組合溶液，并輕輕渦旋

• 選項(xiàng)：如果高濃度的蛋白質(zhì)干擾 DNA 提取和隨后的 DNA 分析，每個(gè)樣品用 20 L 蛋白酶 K (10 mg/mL) 在 60 C 消化 20 min，然后在 95 C 滅活酶 5 min

q 向各微量離心管中加入 500 L 碘化納溶液，輕輕渦旋

q 在 50 ℃ 下孵育 10 min

q 加入 900 L 異丙醇并渦旋。

q 室溫下孵育 30 min

q 以 12000 rpm 離心 15 min

q 輕輕倒出或吸取上清液

q 加入 1.8 mL 洗滌緩沖液（含乙醇）并渦旋

q 以 12000 rpm 離心 10 min

q 輕輕倒出或吸取上清液

q 風(fēng)干 DNA

q 加入 20-60 L 水，輕輕渦旋溶解 DNA

q 純化的 DNA 可通過(guò) PCR、real time PCR、限制性內(nèi)切酶切、DNA 測(cè)序、Picogreen 熒光染色進(jìn)行分析

流程圖：