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Avidity BirA酶(生物素連接酶)說明書

更新時間:2018-03-27      點擊次數(shù):12180

Avidity,LLC于1996年由Millard Cull,Larry Lansing,Ron Gill博士和Mark Seville博士創(chuàng)立,基于生物素對抗生物素蛋白或鏈霉親和素的非凡親和力開發(fā)肽標(biāo)簽和分子生物學(xué)產(chǎn)品。在Affymax擔(dān)任研究人員的同時,Millard參與了AviTag技術(shù)的發(fā)現(xiàn),發(fā)現(xiàn)了其商業(yè)潛力,并獲得了Affymax的*權(quán)利。他開始使用Avidity作為試劑公司,將AviTag技術(shù)的使用權(quán)授予其他公司,并銷售與該技術(shù)一起使用的產(chǎn)品。

帶有AviTag標(biāo)簽的人類全長ORF克隆已經(jīng)被構(gòu)建在多種T7和CMV啟動子表達(dá)系統(tǒng),可以立即購買使用。AviTag標(biāo)簽蛋白可以被體內(nèi)或體外的生物素連接酶生物素化,而且抗生物素蛋白或鏈霉親和素可以專一地與生物素結(jié)合,正基于這兩個反應(yīng),AviTag?技術(shù)可以應(yīng)用于蛋白的固定,純化和顯影。 雖然Avidity是一個小公司,科學(xué)帶來的好處及其AviTag已得到認(rèn)可。目前, AviTag技術(shù)已經(jīng)在22個國家的世界制藥公司和研究人員中得到認(rèn)可。 

隨著Avidity成熟,該公司正在擴大其科學(xué)視野,并調(diào)查使用生物發(fā)光 - 如在深海生物體中發(fā)現(xiàn) - 使其產(chǎn)品對科學(xué)界更有用。Prolume有限公司的Bruce Bryan博士于2004年接觸AvidTag與Prolume的高斯熒光素酶和綠色熒光蛋白(GFP)結(jié)合使用。*款高斯AviTag產(chǎn)品于2007年11月發(fā)布。

此外,Avidity正在與幾家公司合作,通過將非常靈敏的光學(xué)傳感器與基于熒光素酶的測定相結(jié)合,開發(fā)出新一代高度移動,簡單,廉價且功能強大的診斷功能。結(jié)合BP蛋白質(zhì)組學(xué)(新型測定生物化學(xué)),Prolume(發(fā)光/熒光分子和硬件創(chuàng)新專家),黑森林工程(光學(xué)器件工程),Avidity正在開發(fā)用于檢測和鑒定的蛋白質(zhì)和DNA微陣列生物芯片和生物傳感器的疾病病原體和復(fù)合高通量篩選(HTS)。

 

 

BirA酶(生物素連接酶)

貨號:BirA500

品名:BirA biotin-protein ligase standard reaction kit(BirA生物素蛋白連接酶標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)試劑盒)

 

生物素連接酶(Biotin Protein Ligase)用于催化生物素化反應(yīng),將生物素連接到特定的蛋白上。同時它也是生物素誘導(dǎo)抑制劑,常見類型包括大腸桿菌中的BirA。BirA已經(jīng)被廣泛應(yīng)用到各類實驗中,包括真核細(xì)胞實驗。

 

BirA受體-多肽系統(tǒng)在生物素化多肽底物時,具有超高的特異性。BirA可以識別一段多肽序列(生物素受體標(biāo)簽BAT)。當(dāng)融合BAT的蛋白和BirA共表達(dá)時,BAT序列可以被有效生物素化。被生物素化的蛋白質(zhì)可以通過與之有高親和力的抗生物素蛋白或者鏈霉親和素進行一步純化。

BirA催化的生物素化過程一般包含兩個步驟:1. 將生物素和ATP反應(yīng)生成biotinoyl-5‘-AMP, 此過程將活化的生物素被固定在BirA的活性位點上。2. 將活化的生物素通過反應(yīng)偶聯(lián)到BAT序列的特定賴氨酸殘基上  。

 

 

一、BirA酶產(chǎn)品性質(zhì):

貨號

BirA500

濃度

1.0mg/ml

來源:    

E. coli.

酶活性:

5000 Units/µg

Mol wt    

33.5kDa

規(guī)格

20ul

儲存緩沖液

50mM 咪唑(pH 6.8), 50mM NaCl, 10% 甘油, 5mM (DTT)

純度:

> 99%通過考馬斯亮藍(lán)染色

儲存條件:  

 

于干冰中運送,到達(dá)后要立刻置于-80°C中。解凍后分裝,近期使用可保存于4°C,長時間的使用需保存于在-80°C.

 

二、典型的BirA動力學(xué)活性測定

 

 

三、BirA酶的12%聚丙烯酰胺SDS-PAGE凝膠圖譜*

 

https://www.avidity。。com/avitag/bira-500-bira-biotin-protein-ligase-standard-reaction-kit

 

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